單克隆抗體制備 服務(wù)編號:SV2000
一、服務(wù)內(nèi)容
本服務(wù)項目主要是根據(jù)客戶的要求免疫Balb/c小鼠,提取B細(xì)胞與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞融合,制備特異性的鼠單克隆抗體。
1、客戶可提供抗原制備鼠源單克隆抗體,抗原可包含:天然蛋白、重組蛋白、細(xì)胞或細(xì)胞提取液、病毒或病原體、菌種或菌體蛋白、小分子多肽、化合物;其中小分子多肽和化合物等半抗原免疫前需偶聯(lián)載體蛋白。
2、客戶可提供蛋白名稱、GeneID、核酸序列、氨基酸序列等信息,我公司根據(jù)客戶的實驗需求設(shè)計抗原、合成多肽抗原或表達(dá)蛋白抗原,免疫動物制備單克隆抗體。
3、可提供抗體標(biāo)記、抗體對篩選、試劑盒開發(fā)、免疫學(xué)檢測等增值服務(wù)。
Tip: 請您填寫項目申請表,以便Bioss為您提供更好的技術(shù)服務(wù)。
二、 服務(wù)流程
1、客戶提交單克隆抗體制備請求并明確對抗體的要求,與公司商定具體的制備項目、數(shù)量和費用,雙方簽訂《委托單克隆抗體制備合同》。
2、客戶提供抗原或抗原信息,我公司按照合同要求安排單克隆抗體制備服務(wù),并在規(guī)定時間內(nèi)完成制備委托。
3、抗體制備完成后,我公司按照客戶要求純化分裝,免費低溫郵寄給客戶,同時提供抗體制備報告。
三、 樣品要求
1、客戶提供制備抗體所需蛋白或多肽片段,抗原純度>85%,數(shù)量>10mg,濃度>1mg/ml。
2、客戶提供的抗原信息應(yīng)包含蛋白抗原的英文全稱、種屬信息、GeneID或序列信息;化合物抗原應(yīng)提供化學(xué)結(jié)構(gòu)式、活性基團(tuán)、溶解性等信息。
3、請?zhí)崆罢f明樣品來源和生物危害等情況,或其他任何特殊情況。
四、 單克隆抗體服務(wù)說明
1、由于免疫抗原的多樣性,對于合成困難的多肽和表達(dá)困難的蛋白,或免疫原性較差的抗原,雙方可商議確制備周期和制備費用。如果是抗原(主要是多肽抗原或小分子抗原)的免疫原性差,無法使動物產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng),則合同終止。
2、 細(xì)胞株保存: 細(xì)胞株凍存后,博奧森可免費幫客戶保存雜交瘤細(xì)胞3個月,如果3個月后,客戶有繼續(xù)保存細(xì)胞株的需求,每個細(xì)胞株每月收費:詢價(可包年)。
3、 保密承諾:客戶對其委托制備的單克隆抗體擁有完全的知識產(chǎn)權(quán)、商業(yè)價值和使用權(quán),我公司有為客戶保密的義務(wù)和職責(zé),承諾嚴(yán)格保護(hù)客戶提供產(chǎn)品信息資料不外泄。
五、單克隆抗體收費標(biāo)準(zhǔn)
步 驟 |
內(nèi) 容 | 標(biāo) 準(zhǔn) |
時 間 |
收 費 |
階段Ⅰ | 制備抗原 | a. 客戶提供蛋白抗原,或多肽偶聯(lián)蛋白; | 0 | 詢價 |
b. 客戶提供多肽,博奧森偶聯(lián)載體蛋白; | 1周 | 詢價 | ||
c. 原核系統(tǒng)表達(dá)蛋白; | 4周 | 詢價 | ||
d. 設(shè)計、合成多肽、偶聯(lián)載體蛋白(15aa左右); | 2周 | 詢價 | ||
e. 磷酸化、甲基化修飾多肽、偶聯(lián)載體蛋白(包括:設(shè)計修 飾多肽兩條,分別合成及偶聯(lián),未修飾多肽一條); |
2周 | 詢價 | ||
f. 特殊修飾多肽 | 待定 | 詢價 | ||
階段Ⅱ | 動物免疫和ELISA檢測 | 蛋白抗原免疫5只Balb/c小鼠,最終達(dá)到融合效價>1:16000 | 6-8周 | 詢價 |
修飾多肽抗原設(shè)計兩條,則分別免疫兩組Balb/c小鼠, 即5只×2=10只,最終取一只達(dá)到融合效價>1:16000以上 |
6-8周 | 詢價 | ||
階段Ⅲ | 融合和篩選 |
選出最佳免疫應(yīng)答的一只Balb/c小鼠的脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn) 行細(xì)胞融合,經(jīng)過多次篩選得到需要的雜交瘤細(xì)胞株, 在經(jīng) 過多次測定細(xì)胞株穩(wěn)定性試驗,優(yōu)化出穩(wěn)定分泌特異性抗體 的雜交瘤細(xì)胞株; |
4-8周 | 詢價 |
階段Ⅳ |
亞克隆及擴(kuò) 增 |
將已選出的陽性的雜交瘤細(xì)胞株通過有限稀釋法進(jìn)行亞克隆, 最后確定一株陽性克隆做亞型鑒定。 |
4-6周 | 詢價 |
階段Ⅴ | 生產(chǎn)腹水 | 選擇2個陽性克隆株或指定細(xì)胞株大量生產(chǎn)腹水,10-20ml/株 | 3周 | 詢價 |
階段Ⅵ | 抗體純化 | a.Protein G純化10mL腹水 | 1周 | 詢價 |
b.免疫親和層析純化10mL腹水 | 1周 | 詢價 | ||
階段Ⅶ |
完成交付產(chǎn)品 |
a.2-5個亞克隆細(xì)胞株 b.5-10mL腹水×2株 (凍干粉) c.IgG: 1-5mg (免疫純化) (凍干粉) d.10mg (Protein G純化) (凍干粉) e.制備報告 |
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可提供增值服務(wù) |
博奧森可根據(jù)客戶需求提供下列標(biāo)記、檢測服務(wù)(詢價): 1.抗體標(biāo)記:酶標(biāo)記、生物素標(biāo)記、熒光素標(biāo)記、膠體金標(biāo)記 2.制備抗體親和層析柱(客戶用于提純蛋白) 3.抗體對篩選,試劑盒開發(fā) 4.免疫學(xué)檢測:WB檢測,IHC/IF檢測,F(xiàn)CM檢測 |
詢價 |