Bioss 細胞凋亡檢測試劑盒
產(chǎn)品優(yōu)勢
①檢測效果好：特異性強、靈敏度高，對細胞凋亡的結(jié)果進行檢測，陰陽性分群效果明顯。
②操作簡便快捷：只需分別加入緩沖液、熒光標(biāo)記物Annexin V和核染色液PI即可；且染色僅需15-20分鐘。
③檢測方法多樣：可以使用流式細胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設(shè)備進行檢測。
④質(zhì)量保證：原材料自主研發(fā)，嚴格質(zhì)量控制，無憂售后。
試劑盒簡介
Annexin V細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V Apoptosis Detection Kit)是用熒光素FITC/AF647標(biāo)記的重組人Annexin V來檢測細胞凋亡時出現(xiàn)在細胞膜表面的磷脂酰絲氨酸的一種細胞凋亡檢測試劑盒。還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液，碘化丙啶可以染色壞死細胞或凋亡晚期喪失細胞膜完整性的細胞，呈現(xiàn)紅色熒光。對于壞死細胞，由于細胞膜的完整性已經(jīng)喪失，Annexin V-FITC/Annexin V-AF647可以進入到細胞漿內(nèi)，與位于細胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰絲氨酸結(jié)合，從而也使壞死細胞呈現(xiàn)綠色/紅色熒光。
BA00101試劑盒檢測結(jié)果
Annexin V-FITC試劑盒的流式檢測效果參考圖1，熒光顯微鏡檢測效果參考圖2
圖1
圖1.細胞用本試劑盒染色后流式細胞儀檢測效果驗證圖。Jurkat細胞用10μM喜樹堿(Camptothecin)作用4小時后，未經(jīng)染色(A)、僅用本試劑盒中的PI進行染色(B)、僅用本試劑盒中的Annexin V-FITC進行染色(C)、用本試劑盒中的Annexin V-FITC和PI進行雙染(D)。從圖中可以看出，未經(jīng)染色的是雙陰性細胞(A)，僅PI染色后出現(xiàn)了預(yù)期的PI染色陽性的細胞，僅Annexin V-FITC染色出現(xiàn)了預(yù)期的Annexin V-FITC染色陽性的細胞，Annexin V-FITC和PI雙染出現(xiàn)了預(yù)期的僅Annexin V-FITC染色陽性的凋亡細胞和雙陽性的壞死細胞。實測數(shù)據(jù)可能會因細胞類型、細胞凋亡情況、檢測儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
圖2
圖2. Annexin V-FITC和碘化丙啶(PI)染色效果圖。圖中綠色熒光為Annexin V-FITC染色細胞(圖a)，紅色熒光為碘化丙啶染色細胞(圖b)。僅被綠色熒光染色的為凋亡細胞，被綠色和紅色熒光雙染的是壞死細胞(圖c)，未被熒光染色的為正常細胞。
Annexin V檢測原理
Annexin V是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine，簡稱PS)高親和力特異性結(jié)合。在正常細胞中，磷脂酰絲氨酸（PS）只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細胞凋亡早期，細胞膜中的磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標(biāo)記的Annexin V，即Annexin V-FITC，就可以用流式細胞儀或熒光顯微鏡非常簡單而直接地檢測到磷脂酰絲氨酸的外翻這一細胞凋亡的重要特征。此方法被公認為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。
